在線留言
在線客服
24小時服務熱線：18225607483
方經理：355185756
方經理：18225607483
楊經理：15156810450
夏經理：15395124213
HBEC-5i人大腦內皮細胞
獲取鑒定，請聯(lián)系客服
貨號SD-16745
規(guī)格
產品推薦
-
立即咨詢 -
立即咨詢
-
立即咨詢
-
立即咨詢
產品描述
種屬: 人源（Homo sapiens）
組織來源: 腦（Brain）
疾病: 正常（Normal）
年齡: 未知（Unknown）
性別: 男（Male）
細胞類型: 內皮細胞（Endothelial）
生長特性: 貼壁生長（Adherent）
拆包 & 存儲
1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2. 請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
注意：如為凍存管，請收到后立即解凍培養(yǎng)。若來不及解凍，請儲存于液氮中（存儲于負80度，會降低細胞存活率）
培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟
對于貼壁培養(yǎng)的細胞，寄送前，我們會將運輸培養(yǎng)基（收到后請使用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)）充滿整個培養(yǎng)瓶，以減少產品運輸過程中貼壁細胞的脫落。
1. 收到細胞產品后，請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因在運輸過程中存在顛簸，且有些細胞對溫度變化也很敏感，可能存在一些細胞脫落漂浮的情況，這些細胞仍是活細胞，請勿丟棄，可離心富集后傳代使用。
2. 對于貼壁的細胞，在生物安全柜環(huán)境中，用真空泵去除培養(yǎng)瓶中的多余培養(yǎng)基，至剩余5-8mL左右，隨后將細胞置于含有5%CO? 的37℃恒溫 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，擰松瓶蓋。如果細胞已經長滿培養(yǎng)瓶請立即傳代。
3. 對于懸浮的細胞，在生物安全柜環(huán)境中，轉移培養(yǎng)瓶中的細胞
至離心管中，離心200×g/ 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培養(yǎng)基吹散細胞，轉移至新的培養(yǎng)瓶中，隨后置于含有5% CO? 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
凍存細胞操作步驟
注意：為保存細胞的高存活率，請收到產品后，立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。
2. 一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中， 離心200×g/ 5 - 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。
4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復蘇的存活率，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預熱后使用。
5. 將細胞置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
貼壁細胞傳代培養(yǎng)
1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基。
2. 加入 1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37 ℃培養(yǎng)箱中孵育，直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要2 至3分鐘（此處為12.5 cm2 培養(yǎng)瓶所用體積，可根據實際情況增減用量）。
3. 加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，并輕輕吹打將細胞從培養(yǎng)瓶表面吹落，并使細胞分散。
4. 離心200×g/ 5 - 10 min，去除上清后，取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸, 取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中，并加入新鮮細胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。
5. 將細胞置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
傳代比例：建議 1:2 至 1:4（以培養(yǎng)瓶底面積計算）
培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。
注意：培養(yǎng)板需預先進行包被（包被液組分為： 0.1% Gelatin ）
培養(yǎng)板包被：
1、準備配置好上述包被液組分（4℃可放置1個月）。
2、向培養(yǎng)板中加入包被液，輕輕晃動至培養(yǎng)板底部全部覆蓋均勻（75cm2 底面積，需加入4.5mL 包被液）。
3、將培養(yǎng)板置于37℃培養(yǎng)箱，孵育1h。
4、使用前，將包被液吸走，PBS洗滌一次。
完全培養(yǎng)基配制
該細胞系培養(yǎng)所用培養(yǎng)基為ECM內皮細胞培養(yǎng)基。
使用范圍：本產品僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。
