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培養(yǎng)基 > 細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基 > 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒
間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒
獲取鑒定，請(qǐng)聯(lián)系客服
原價(jià) ￥ 2500.00
現(xiàn)價(jià) 折扣優(yōu)惠請(qǐng)咨詢地區(qū)供應(yīng)商
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貨號(hào)SD-16620
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本產(chǎn)品是精心優(yōu)化的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化試劑盒，可增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的能力。
本產(chǎn)品僅用于科研用途，不可用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。
產(chǎn)品組成成分及保存
|
試劑名稱 |
體積 |
保存條件 |
有效期 |
|
地塞米松 |
20μL |
-20℃ |
1 Year |
|
抗壞血酸 |
400μL |
-20℃ |
1 Year |
|
β-甘油磷酸鈉 |
2mL |
-20℃ |
1 Year |
|
谷氨酰胺 |
2mL |
-20℃ |
1 Year |
|
雙抗 |
2mL |
-20℃ |
1 Year |
|
胎牛血清 |
20mL |
-20℃ |
1 Year |
|
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 |
200mL |
2-8℃ |
1 Year |
|
茜素紅染色液 |
5mL |
RT（室溫） |
1 Year |
? 注意：
1.為保證產(chǎn)品的有效性，請(qǐng)避免反復(fù)凍融。
2.配制好的誘導(dǎo)培養(yǎng)基保存于2-8℃，有效期為2周，請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量合理配制。
產(chǎn)品使用說明
1. 成骨誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基的配制
① 室溫條件下融化各因子及血清。各因子融化后，瞬時(shí)離心，使溶液集中于離心管底部。
（注意：若因子或血清中有沉淀物，屬正?，F(xiàn)象，無須過濾，避免成分丟失。）
② 根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量，于無菌操作臺(tái)中配制誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基，建議每次配制50mL，配制比例見下表：
|
試劑成分 |
配制比例 |
50mL配制體系 |
|
地塞米松 |
0.01% |
5μL |
|
抗壞血酸 |
0.2% |
100μL |
|
β-甘油磷酸鈉 |
1% |
500μL |
|
谷氨酰胺 |
1% |
500μL |
|
雙抗 |
1% |
500μL |
|
胎牛血清 |
10% |
5mL |
|
基礎(chǔ)培養(yǎng)基 |
補(bǔ)充至所需體積 |
補(bǔ)充至總體積為50mL |
2. 成骨誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)步驟
①建議取第3~5代、純度達(dá)90%以上、狀態(tài)良好的間充質(zhì)干細(xì)胞，將其消化下來，離心收集，使用間充質(zhì)干細(xì)胞完全培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞密度為1~5×10^5個(gè)cell/mL，均勻鋪于6孔板中，每孔2mL，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（注意：此處細(xì)胞密度及培養(yǎng)液體積以6孔板為例，若為其它培養(yǎng)器皿，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整細(xì)胞密度及培養(yǎng)液體積。）
②待細(xì)胞匯合度達(dá)80%~100%時(shí)，即可進(jìn)行誘導(dǎo)分化。
③小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清，沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基，每孔2mL，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（注意：完全培養(yǎng)基加入細(xì)胞前需提前置于37℃預(yù)熱。）
③每2day換用新鮮的誘導(dǎo)分化完全培養(yǎng)基。換液時(shí)，若細(xì)胞培養(yǎng)上清顏色變?yōu)槌吻宓狞S色，是由于細(xì)胞量較大，營(yíng)養(yǎng)消耗較快導(dǎo)致的，請(qǐng)及時(shí)調(diào)整為每日換液。
（注意：完全培養(yǎng)基加入細(xì)胞前需提前置于37℃預(yù)熱。）
④細(xì)胞誘導(dǎo)3周后，即可進(jìn)行茜素紅染色鑒定。
3. 茜素紅染色分析
① 細(xì)胞誘導(dǎo)分化結(jié)束后，小心吸棄細(xì)胞培養(yǎng)上清，1×PBS潤(rùn)洗1~2次。每孔加入1mL細(xì)胞固定液（4%中性甲醛溶液等），室溫固定30 min。
② 吸棄細(xì)胞固定液，1×PBS潤(rùn)洗2次。沿孔壁緩慢加入茜素紅染色液，每孔1mL，室溫染色30min。
（注意：染色液底部可能會(huì)有沉淀，吸取時(shí)盡量不要觸及底部。若細(xì)胞染色后有沉淀，1×PBS洗去即可。）
③ 吸出染色液，1×PBS潤(rùn)洗，去掉浮色。顯微鏡下觀察細(xì)胞染色效果，鈣鹽呈較深的橙紅色。
（注意：染色液可重復(fù)使用，建議收集。）
質(zhì)量控制
ü 無菌檢測(cè)（細(xì)菌、真菌和支原體檢測(cè)）
ü pH測(cè)試
ü 滲透壓檢測(cè)
ü 內(nèi)毒素
