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貨號SD-17155
規(guī)格
產(chǎn)品描述
種屬: 人源(Homo sapiens)
組織來源: 胸腔積液(Pleural effusion)
疾病: 兒童T型急性淋巴細胞白血病
(Childhood T acute lymphoblastic leukemia)
年齡: 6歲(6 years)
性別: 女(Female)
細胞類型: 圓形到橢圓形細胞(round to oval cells)
生長特性: 懸浮生長(Suspension)
拆包 & 存儲
1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2. 請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
注意:如為凍存管,請收到后立即解凍培養(yǎng)。若來不及解凍,請儲存于液氮中(存儲于負80度,會降低細胞存活率)
培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟
對于懸浮培養(yǎng)的細胞,寄送前,我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶,以減少產(chǎn)品運輸過程中細胞所受震蕩。
1. 收到細胞產(chǎn)品后,請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。
2. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于37℃培養(yǎng)箱中直至溫度平衡,隨后,在生物安全柜中,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管中,離心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5mL培養(yǎng)基吹散細胞。
3. 對上述細胞懸液進行細胞計數(shù)及活力檢測,調(diào)整細胞密度至2-3×10^5 cells/mL,并轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中。
4. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞達到傳代培養(yǎng)的密度,則進行傳代培養(yǎng)。
凍存細胞操作步驟
注意:為保存細胞的高存活率,請收到產(chǎn)品后,立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動,迅速解凍。為避免污染, 確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約2分鐘。
2. 一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中, 離心200×g / 5 - 10 min,用真空泵去除含有凍存液的上清。
4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復(fù)蘇的存活率,請將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。
5. 將細胞置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
懸浮細胞傳代培養(yǎng)
懸浮細胞的傳代可通過補加或置換新鮮培養(yǎng)基的方式來完成, 具體做法如下:
1. 取出少量細胞懸液進行細胞計數(shù)及活力檢測,當細胞密度達到1.5×10^6 cells/mL 時,進行細胞傳代培養(yǎng)。
2. 取足量細胞加入到盛有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,將細胞密度維持在5×10^5 cells/mL。
3. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞達到傳代培養(yǎng)的密度,則進行傳代培養(yǎng)。
培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。
注意: 培養(yǎng)瓶應(yīng)使用帶濾膜瓶蓋,以保持培養(yǎng)基中的空氣和CO?
完全培養(yǎng)基配制
該細胞系培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為 RPMI1640,配置完全培養(yǎng)基時需加入 10%FBS,1%Anti-Anti。
使用范圍
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。
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