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Human NK Cells Cultured人體外培養(yǎng) NK 細胞
Human NK Cells Cultured
獲取鑒定，請聯(lián)系客服
貨號SD-17151
規(guī)格
產(chǎn)品推薦
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產(chǎn)品名稱
中文名稱：人體外培養(yǎng) NK 細胞
英文名稱：Human NK Cells Cultured
規(guī)格：1ML
預(yù)期用途：可作為多種領(lǐng)域研究所需的原材料。
貯藏條件與有效期
置于液氮保存，有效期為 24 個月；
生產(chǎn)日期，有效期至：見標簽。
產(chǎn)品簡介
NK 細胞是人體免疫的第一道防線，是一類無需預(yù)先致敏就能非特異性殺傷腫瘤細胞和病毒感染細胞的淋巴細胞，具有非限制性殺傷的特點。NK 細胞占外周血的 5-10%，不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，而且在某些情況下參與超敏反應(yīng)和自身免疫性疾病的發(fā)生，能夠識別靶細胞，殺傷介質(zhì)。
【操作步驟】
所需試劑：
1 、IMDM，α-MEM 或 RPMI-1640
2 、FBS
3 、DNase I
操作流程：
1 準備好 37°C 水浴，將 RPMI-1640 與 FBS 溫浴至 37°C；
2 生物安全柜中，配制含 10% FBS 的培養(yǎng)基（IMDM, α-MEM 或 RPMI-1640 均可），待用；
3 從液氮中取出 NK 細胞凍存管，置于-80°C 超低溫冰箱中數(shù)分鐘，使凍存管中的液氮揮發(fā)，而后迅速將其置于 37°C 溫水中，并快速水平晃動，使其內(nèi)含物盡快融化，直至凍存管固體內(nèi)含物余下一小冰屑后取出凍存管；
注意：
1）從液氮中取出凍存管時，往往在凍存管里含有液氮，最好先將凍存管先置于超低溫冰箱中，使液氮揮發(fā)，再進行水浴化凍的操作；
2）盡可能將凍存管的內(nèi)含物全部浸沒于 37°C 溫水中，使內(nèi)含物均勻融化；
3) 請勿使溫水沒過凍存管蓋的螺口，以防污染；
4) 細胞復(fù)蘇的操作過程要迅速，避免影響細胞復(fù)蘇后的活性。
4 在將凍存管拿進生物安全柜之前，用 75%酒精對其表面進行消毒；
5 輕輕重懸細胞，并將其移入裝有 100μg DNase I 的 50mL 離心管里；
注意：
1）加入 DNase I 可有效減少細胞復(fù)蘇后細胞團塊的產(chǎn)生；
2）DNase I 的使用是非必須的，對于 DNA, RNA 等的提取目的可不使用。
6 用 1mL 培養(yǎng)基沖洗凍存管，并將此懸液以 3-5s 每滴的速度滴加到 50mL 離心管中，并且同時輕輕搖晃離心管，使滴加的懸液混勻；
7 吸取 15-20mL 的培養(yǎng)基以 3-5s 每滴的速度滴加到 50mL 離心管中，并且同時輕輕搖晃離心管， 使滴加的懸液混勻；
注意：第 5,6,7 步驟可使細胞中的 DMSO 緩慢均勻的滲透出來，最大程度保證細胞安全，但操作較為緩慢，若有多個樣品需要處理時，可以將操作步驟更改為：
5’：輕輕重懸細胞，并將其移入裝有 100μg DNase I 的 15mL 離心管里；
6’：用 1mL 培養(yǎng)基沖洗凍存管，并將此懸液合并到到 15mL 離心管里；
7’：吸取 10mL 培養(yǎng)基，直接加入到 15mL 離心管中，反復(fù)輕柔吹打或上下顛倒混勻，室溫孵育 10min；
8 室溫下，300g 離心 10min；
9 迅速使用移液槍吸走上清，剩余少許液體，并輕輕吹打液體使細胞懸??；
注意：
1）離心結(jié)束后，盡快吸走上清；
2) 吹打液體時動作要輕，避免損傷細胞，并且吹打時盡可能避免氣泡產(chǎn)生。
10 緩慢加入 15-20mL 新鮮培養(yǎng)基（快速法中則只要在 15mL 離心管中加入 10mL 培養(yǎng)基即可），并同時輕輕搖晃離心管；
11 室溫下，300g 離心 10min；
12 迅速使用移液槍吸走上清，剩余少許液體，并輕輕吹打液體使細胞懸浮，此 NK 細胞即可用于下游實驗。
產(chǎn)品性能指標
產(chǎn)品性能符合本企業(yè)制定的產(chǎn)品技術(shù)要求。
重要說明
細胞培養(yǎng)服務(wù)所得細胞僅限用于科學研究使用，不得用于臨床診斷及臨床治療，否則由此
引起一切后果由使用方承擔。
