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Toledo彌漫性大細胞淋巴瘤
Toledo
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貨號SD-17021
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產品描述
種屬: 人源（Homo sapiens）
組織來源: 外周血（Peripheral blood）
疾病: 彌漫性大 B 細胞淋巴瘤（Diffuse large B-cell lymphoma）
年齡: 成人（Adult）
性別: 女（Female）
細胞類型： 淋巴細胞（Lymphoblast）
生長特性: 懸浮生長（Suspension）
拆包 & 存儲
1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2. 請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
注意：如為凍存管，請收到后立即解凍培養(yǎng)。若來不及解凍，請儲存于液氮中（存儲于負80度，會降低細胞存活率）
培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟
對于懸浮培養(yǎng)的細胞，寄送前，我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶，以減少產品運輸過程中細胞所受震蕩。
1. 收到細胞產品后，請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。
2. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于37℃培養(yǎng)箱中直至溫度平衡，隨后，在生物安全柜中，轉移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管中，離心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5mL培養(yǎng)基吹散細胞。
3. 對上述細胞懸液進行細胞計數(shù)及活力檢測，調整細胞密度至2-3×10^5 cells/mL，并轉移至新的培養(yǎng)瓶中。
4. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞達到傳代培養(yǎng)的密度，則進行傳代培養(yǎng)。
凍存細胞操作步驟
注意：為保存細胞的高存活率，請收到產品后，立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染， 確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。
2. 一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中， 離心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。
4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復蘇的存活率，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預熱后使用。
5. 將細胞置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
懸浮細胞傳代培養(yǎng)
懸浮細胞的傳代可通過補加或置換新鮮培養(yǎng)基的方式來完成， 具體做法如下：
1. 取出少量細胞懸液進行細胞計數(shù)及活力檢測，當細胞密度達到1.5×10^6 cells/mL 時，進行細胞傳代培養(yǎng)。
2. 取足量細胞加入到盛有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，將細胞密度維持在5×10^5 cells/mL。
3. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO? 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞達到傳代培養(yǎng)的密度，則進行傳代培養(yǎng)。
培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。
注意：
培養(yǎng)瓶應使用帶濾膜瓶蓋，以保持培養(yǎng)基中的空氣和CO?
完全培養(yǎng)基配制
1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
注意：用推薦的完全培養(yǎng)基重懸細胞沉淀，并分配到T25培養(yǎng)瓶中。在細胞回收過程中避免培養(yǎng)基堿度過高非常重要。建議在添加小瓶內容物之前，將含有完全生長培養(yǎng)基的培養(yǎng)容器放入培養(yǎng)箱中至少 15 分鐘，以使培養(yǎng)基達到正常 pH 值（7.0 至 7.6）。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
使用范圍
本產品僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。
